ይህን የኢንሹራኒኮኬሚካል ማበጃ ማቆያ ማዘጋጀት እንዴት እንደሚሰራ
Phosphate buffalo saline (PBS) ለሞፈኖይከክኬሚካል (IHC) ማቅለሚያ በብዛት ጥቅም ላይ የዋለ ሲሆን ብዙ ጊዜ ደግሞ ባዮሎጂካል ጥናት ውስጥ ይሠራበታል. ፒኤስቢ (PBS) ሶዲየም ሃይድሮጂን ፎስፌት, ሶዲየም ክሎራይድ እና በአንዳንድ ሁኔታዎች ፖታስየም ክሎራይድ እና ፖታስየም ዳይኦቫኒየም ፎስፌት የያዘ የውኃ መሰረት የሆነ የጨው ነው.
Immunohistochemical Staining
Immunohistochemical (ኬሚስትሪ) በቢዮሎጂካዊ ሕዋሳት ውስጥ ፀረ አዕዋስ ጋር የሚጣጣሙ ፀረ እንግዳ ፈሳሾች (መርዛማ ንጥረ-ነገሮች) በመጠቀም በመርፌ ውስጥ ያሉ የፕሮቲን ዓይነቶች (ፕሮቲን) የመሳሰሉ አንቲጂኖችን የማጣሪያ ሂደትን የሚያመለክት ነው.
Immunofluorescent ድብልብጥ የመጀመሪያው የበሽታ መከላከያ ዘዴ ነው.
አንቲጂኖች ፀረ እንግዳ አካላት (አንቲጂን) - ፀረ-ንጥረ-ምህንድስና (አንቲጂን) የሚይዙ ጥቃቅን (አንቲጂን) ፀረ-ተውኔሽን (አንቲጂን) መያዣ (ሪፕሊንዴሽን) ተጎጂነት በመጠቀም ፀረ-ፀረ-ተባይ መድሐኒቶችን በመጠቀም ፀረ እንግዳ አካላትን በማየት ሊታዩ ይችላሉ.
የመፍትሔው የመስታስነት እና የ ion ክምችት ከሰው አቅም ጋር ተመሳሳይነት አላቸው - እነሱ አይዞቶኒክ ናቸው.
የፒ.ቢ.ኤስ. ቅምጥ
PBS በተለያየ መንገድ ማዘጋጀት ይችላሉ. በርካታ ቀመሮች አሉ. ከእነዚህ ውስጥ አንዳንዶቹ ፖታስየም የሌሉ ሲሆን ሌሎቹ ደግሞ ካልሲየም ወይም ማግኒዝየም ይዘዋል.
ይህ አሰራር በአንፃሩ ቀላል ነው. ለ 10X PBS stock solution (0.1 ሜ) ነው. ሆኖም ግን, 1X የችሎታ መፍትሄን ማዘጋጀት ይችላሉ, ወይም በዚህ የ 10X የምግብ አዘገጃጀት መመሪያ ይጀምሩ እና ወደ 1X ያሽከረክሩ.
ጠቅላላው ሂደት 10 ደቂቃ ያህል ይወስዳል.
Tween ለማከል አማራትም ይቀርባል.
ምን PBS ቴምብር እንዲኖር ማድረግ ይኖርብዎታል
- ሶዲየም ፎስፌት ሞለባሲክ (አንጀት)
- ሶዲየም ፎስፌት ዲያስክ (አሪያድ)
- ሶዲየም ክሎራይድ
- ሚዛንና ክብደት ጀልባዎች
- መግነጢሳዊ ተዋናይ እና ማረፊያ አሞሌ
- ፒኤች (ፒኤች) ለማስተካከል የተስተካከሉ እና ተገቢ የሆኑ መፍትሄዎችን የሚያስተካክል የፒ ኤች A መለየት
- 1L የቮልቴሪክ ብስክሌት
- Tween 20 (አማራጭ)
ፎሊያተሪ የተቀቀለ ሳሊን (PBS) እንዴት እንደሚሰራ
ክብደቱ 10.9 ግራኒየም ሶዲየም ፎስፌት dibasic (Na2HPO4), 3.2 g ናይትራል ሶድየም ፎስፌት ሞለኪስ (NaH2PO4) እና 90 ግ ሶድየም ክሎራይድ (NaCl).
ከ 1 ሊትር ውሀ በታች ብቻ ይቅሙ.
PH ን ወደ 7.4 ያስተካክሉት እና መፍትሄው ወደ 1 ቮልት የመጨረሻ ቅደም ተከተል ይፍጠሩ.
አስፈላጊ ከሆነ ፒተሩን ከመጠቀምዎ በፊት አጣራሹን 10X ይለውጡ.
5 ሊትር ቲየን ከ 20 እስከ 1 ኤል መፍትሄ በመጨመር የ 0.5% Tween 20 የፒ.ሲ.ኤስ መፍትሄ ማዘጋጀት ይችላሉ.
PBS Buffer ን ለማዘጋጀት ጠቃሚ ምክሮች
የ PBS መፍትሄን ካጠናቀቁ በኋላ ጽፋቱን በቤት ሙቀት ውስጥ ያከማቹ.
ፈሳሽ ያልሆኑ ፈሳሾች ምትክ ሊሆኑ ይችላሉ, ነገር ግን ተጨማሪ የውሃ ሞለኪውሎችን ለማስተናገድ ተገቢውን ክብትን እንደገና ማስላት ይኖርብዎታል.
ፎስፌት የሚጨመረው የጨው ምግብ (ፒቢኤስ)
Phosphate buffalo saline ብዙ ጥቅም አለው ምክንያቱም ለአብዛኛዎቹ ሕዋሳት (መርዛማነት) እና የማይበክል ነው. ቁሳቁሶችን ለማርከስ ጥቅም ላይ ይውላል እና ብዙውን ጊዜ የሴሎችን ኮንቴይሎች ለማጣራት ያገለግላል. ለምሳሌ, በውስጡ ያሉት የውሃ ሞለኪውሎች በተመጣጣኝ ይዘት-ፕሮቲን ዙሪያ ስለሚዋሃዱ, ፒቢኤስ በተለያዩ ዘዴዎች ተንቀሳቃሽ መሳሪያዎችን ለማድረቅ ጥቅም ላይ ሊውል ይችላል. "ይደርቃል" እና ወደ አንድ ጥብቅ መሬት ይንቀሳቀሳል.
የፒኤች (ሴል) ጥቃቅን ተክልን ለመግታት የማያቋርጥ እና ቀጣይነት ያለው ነው.
ከዚህ ንጥረ ነገር ጋር የሚጣጣም ቀጭዱ የውሃ ፊንች ዲየሌሽን ወይም ሌሎች ተያያዥነት ያላቸው ለውጦችን ይከላከላል. የካርቦኔት ምጥበተሮች ለተመሳሳይ ዓላማ ጥቅም ላይ ሊውሉ ይችላሉ ነገር ግን በአነስተኛ ውጤታማነት.
ፒፕሲ (ፔፕሲሜትሪ) በፕሮቲን ውስጥ ያለውን የፕሮቲን ሞለኪንግ (ፕራይም ኦፕሬሽንን) ሲለካ መጠንን ለመለየት ሊረዳ ይችላል.